發(fā)布時(shí)間:2024-04-01 發(fā)布作者:上海通蔚生物
作為ELISA的最后一步,結(jié)果計(jì)算對于檢測的成功至關(guān)重要,下面上海通蔚給大家介紹一下elisa結(jié)果計(jì)算。
1. ELISA 樣品總是一式兩份或一式三份進(jìn)行測試,然后計(jì)算每組吸光度值的平均值
標(biāo)準(zhǔn)和樣品。
2. 減去零標(biāo)準(zhǔn)OD的平均值(競爭性ELISA過程中不需要此步驟)。
3. 創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。
在雙對數(shù)方格紙上繪制四參數(shù)邏輯曲線,x 軸為標(biāo)準(zhǔn)濃度,y 軸為 OD 值。推薦使用Origin軟件。如果需要了解Origin軟件可以參考(http://www.originsoft.cn/)。
具體如下:
第一步:輸入標(biāo)準(zhǔn)品的OD值和濃度信息
步驟2:選擇曲線類型:
選擇數(shù)值框,然后依次選擇項(xiàng)目,如下所示。
Step3:選擇具體的X/Y:設(shè)置完以上各項(xiàng)后,點(diǎn)擊Fit按鈕,則生成如步驟4所示的曲線及其信息。 Step4:查看標(biāo)準(zhǔn)曲線的信息(參數(shù)值、R-Square) , ETC。)
步驟5:將軸設(shè)置為雙對數(shù)類型。
雙擊步驟4中的擬合曲線圖,使曲線處于可編輯狀態(tài)。然后雙擊X軸和Y軸將其設(shè)置為日志類型。
第六步:根據(jù)曲線計(jì)算濃度
選擇第 4 個(gè)工作表(Fit NLF Find X from Y1),在左欄輸入或復(fù)制樣品的 OD 值,將自動(dòng)計(jì)算濃度。
如果樣品的OD值超出夾心標(biāo)準(zhǔn)曲線的上限(或超出競爭性ELISA的下限),則在進(jìn)行ELISA之前應(yīng)將這些樣品稀釋以獲得準(zhǔn)確的結(jié)果。對于這些樣品,在分析結(jié)果時(shí)必須將標(biāo)準(zhǔn)曲線得出的濃度乘以稀釋倍數(shù)。上述對于elisa結(jié)果計(jì)算還有不明白的,歡迎前來咨詢我們elisa顧問。