三明治夾心法ELISA法能否捕捉大腸桿菌蹤跡？一文帶你了解

  ELISA 代表酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定。 ELISA 有多種類(lèi)型，包括夾心 ELISA、間接 ELISA、直接 ELISA 和競(jìng)爭(zhēng)ELISA，所有這些都用于檢測(cè)抗體。那么，為什么 ELISA 三明治檢測(cè)與流行的午餐菜單項(xiàng)目相關(guān)呢？它被稱(chēng)為三明治，因?yàn)樗褂脙煞N抗體，它們之間結(jié)合有抗原（有點(diǎn)像三明治）,不過(guò)在常規(guī)的叫法中，我們叫它夾心ELISA。請(qǐng)繼續(xù)閱讀，了解有關(guān) ELISA 夾心測(cè)定的更多信息、它與其他類(lèi)型的不同之處以及其過(guò)程是什么樣的。同時(shí)我也會(huì)給你介紹一下它能否檢測(cè)大腸桿菌。關(guān)于elisa試劑盒類(lèi)型，可以參考這篇文章《elisa試劑盒有哪幾種類(lèi)型？elisa四類(lèi)型圖解》

  夾心ELISA檢測(cè)的目的

  任何 ELISA 都用于發(fā)現(xiàn)樣本中的目標(biāo)抗原。然而，在夾心測(cè)定中，抗原結(jié)合在檢測(cè)抗體和捕獲抗體之間。一般來(lái)說(shuō)，捕獲抗體固定在微孔板上。相反，檢測(cè)抗體（與酶或熒光團(tuán)標(biāo)記結(jié)合）作為檢測(cè)前的最后一步應(yīng)用。與其他 ELISA 類(lèi)型相比，夾心法更具特異性和敏感性，更適合更復(fù)雜的情況。

  夾心法elisa檢測(cè)流程

  在大多數(shù)情況下，夾心測(cè)定過(guò)程如下：

  1、涂上捕獲抗體。表面可以是磁珠或多孔板。孵育后，應(yīng)清洗未結(jié)合的抗體以提高靈敏度。

  2、阻止表面上未結(jié)合的蛋白質(zhì)結(jié)合面。使用封閉緩沖液，例如牛血清白蛋白 (BSA)、酪蛋白或胎牛血清 (FBS)，有助于減少背景和非特異性結(jié)合。

  3、添加目標(biāo)抗原（樣品）。首先孵育，使目標(biāo)抗原能夠與捕獲抗體結(jié)合。然后，洗滌以除去未結(jié)合的抗原。

  4、添加檢測(cè)抗體標(biāo)記結(jié)合物。然后，孵育并洗滌。

  5、檢測(cè)。測(cè)量吸光度、熒光、顯色或化學(xué)發(fā)光讀數(shù)。

  夾心法ELISA 測(cè)定法的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)

  夾心檢測(cè)的最大優(yōu)點(diǎn)是其靈敏度（也稱(chēng)為檢測(cè)限）。如果您的一抗和二抗對(duì)具有高親和力和特異性，則靈敏度會(huì)顯著提高。

  夾心測(cè)定的一個(gè)缺點(diǎn)是二抗可能會(huì)產(chǎn)生錯(cuò)誤的讀數(shù)，因?yàn)橐豢购投共痪哂懈咛禺愋院陀H和力。在這種情況下，二抗可能會(huì)與捕獲抗體結(jié)合，從而給出錯(cuò)誤的讀數(shù)。如果想了解一抗和二抗，可以參考《科研實(shí)驗(yàn)必備知識(shí)：一抗與二抗的區(qū)別》

  夾心法ELISA能檢測(cè)大腸桿菌嗎

  大腸桿菌是一種細(xì)菌，具有特定的抗原決定簇。如果我們可以獲得針對(duì)這些抗原決定簇的特異性抗體，那么理論上是可以使用夾心法ELISA來(lái)檢測(cè)大腸桿菌的。實(shí)際上，已經(jīng)有研究報(bào)道了使用夾心法ELISA來(lái)檢測(cè)大腸桿菌或其相關(guān)抗原的方法[1]。

  如果你打算進(jìn)行這方面的研究，建議查閱相關(guān)的文獻(xiàn)報(bào)道，以獲取更詳細(xì)的信息和實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。當(dāng)然也可以咨詢(xún)我們?cè)诰€(xiàn)ELISA顧問(wèn)，我們也可以為您提供這方面的試劑盒檢測(cè)服務(wù)。

參考文獻(xiàn)和注釋

  Kerr P、Chart H、Finlay D 等人。動(dòng)物和人大腸桿菌O157菌株單克隆夾心ELISA檢測(cè)方法的建立[J].應(yīng)用微生物學(xué)雜志, 2001, 90(4): 543-549?！?a target="_blank">谷歌學(xué)術(shù)】