上文提到到基本培養(yǎng)基DMEM,這種培養(yǎng)基在實驗室應用比較廣泛。今天,上海通蔚生物來說下RPMI-1640培養(yǎng)基,它和DMEM培養(yǎng)基都屬于體外培養(yǎng)哺乳動物細胞的基礎培養(yǎng)基。通過RPMI-1640培養(yǎng)基的歷史由來、成分和DMEM區(qū)別來詳解。
RPMI-1640培養(yǎng)基的歷史由來
RPMI1640,簡稱RPMI培養(yǎng)基,是一種常用于培養(yǎng)哺乳動物細胞的細胞培養(yǎng)基。 RPMI1640由GeorgeE.Moore、RobertE.Gerner和H.AddisonFranklin于1966年在羅斯威爾公園綜合癌癥中心(前身為羅斯威爾公園紀念研究所)開發(fā),并由此得名。?McCoy5A培養(yǎng)基(或RPMI1630)的改良版,最初配制用于支持懸浮培養(yǎng)中的類淋巴母細胞,但也可以支持多種貼壁細胞。
RPMI-1640培養(yǎng)基成分組成
RPMI-1640培養(yǎng)基的成分組成相當豐富,主要包括以下幾類:
1.氨基酸:
必需氨基酸:L-精氨酸、L-胱氨酸、L-谷氨酰胺、L-組氨酸、L-異亮氨酸、L-亮氨酸、L-賴氨酸、L-蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-蘇氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸、L-纈氨酸
非必需氨基酸:L-丙氨酸、L-天冬酰胺、L-天冬氨酸、L-谷氨酸、甘氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸
2.維生素:
生物素、葉酸、煙酰胺、泛酸、吡哆醇、核黃素、硫胺素、維生素B12、膽堿、肌醇、維生素A、維生素D3、維生素E、維生素K
3.無機鹽和微量元素:
氯化鈣、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈉、磷酸氫二鈉、硫酸鈉、硝酸鐵、硫酸鋅、硫酸銅、鉬酸鈉、硒酸鈉
4.其他成分:
葡萄糖:提供細胞能量來源
酚紅:pH指示劑,顏色隨pH值變化而變化
碳酸氫鈉:緩沖系統(tǒng)的一部分,維持培養(yǎng)基pH值穩(wěn)定
5.可選成分:
丙酮酸鈉:額外的能量來源
HEPES:另一種緩沖劑,可在無CO2環(huán)境中使用
牛血清或其他血清:提供生長因子、激素和其他細胞生長所需的物質
RPMI-1640培養(yǎng)基和其它培養(yǎng)基區(qū)別在那里
RPMI-1640培養(yǎng)基與其他常用培養(yǎng)基(如DMEM、MEM等)在成分、應用和培養(yǎng)條件等方面存在一些區(qū)別:
1.營養(yǎng)成分:
葡萄糖濃度:RPMI-1640的葡萄糖濃度(2g/L)比DMEM(1g/L)和MEM等培養(yǎng)基更高,更適合于快速生長的細胞,例如淋巴細胞。
氨基酸:RPMI-1640包含更多種類和更高濃度的氨基酸,尤其是非必需氨基酸,使其更適合于對營養(yǎng)要求較高的細胞。
維生素:RPMI-1640也含有更高濃度的維生素,例如B族維生素。
2.緩沖系統(tǒng):
RPMI-1640:主要使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng),需要在含5%CO2的環(huán)境中才能有效維持pH值穩(wěn)定。
DMEM和MEM:通常使用HEPES緩沖系統(tǒng),可以在無CO2環(huán)境中維持pH值穩(wěn)定。
3.應用:
RPMI-1640:更常用于培養(yǎng)懸浮細胞,例如淋巴細胞、雜交瘤細胞和一些白血病細胞系,也適用于一些貼壁細胞。
DMEM:更常用于培養(yǎng)貼壁細胞,例如成纖維細胞、上皮細胞等。
MEM:適用于多種細胞類型,包括貼壁細胞和懸浮細胞。
4.其他區(qū)別:
滲透壓:RPMI-1640的滲透壓略高于DMEM和MEM。
無機鹽:RPMI-1640含有更高濃度的某些無機鹽,例如磷酸鹽和硫酸鹽。
選擇培養(yǎng)基的考慮因素
細胞類型:不同細胞類型對營養(yǎng)物質的需求不同。
實驗目的:例如,研究細胞生長或代謝可能需要不同的培養(yǎng)基。
培養(yǎng)條件:是否需要CO2培養(yǎng)環(huán)境。
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