血清與血漿：深入探討其分子組成及其對(duì) ELISA 的影響

  血漿和血清是血液的重要組成部分，具有不同的分子組成和在醫(yī)學(xué)和研究領(lǐng)域的用途。上海通蔚今天為大家闡明血清和血漿之間的差異并回答最常見(jiàn)的問(wèn)題。

什么是血清與血漿？

  血液由紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板和稱(chēng)為血漿的液體部分組成。當(dāng)血液被收集并凝固時(shí)，固體成分（例如纖維蛋白和血細(xì)胞）被分離，留下透明的淡黃色液體，稱(chēng)為血清。

  相比之下，血漿是使用抗凝劑防止血液凝固時(shí)殘留的液體。血清和血漿之間的主要區(qū)別在于凝血因子。血漿含有凝血因子，而血清本質(zhì)上是不含這些因子的血漿。

  血清和血漿都含有水、電解質(zhì)、激素、廢物、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、氣體和蛋白質(zhì)。血漿還含有纖維蛋白原和其他用于凝塊形成的凝血因子。例如，由于這些差異，半衰期分子在血漿和血清中的存在方式可能不同。根據(jù)這些凝血因子的存在或不存在，其半衰期可能會(huì)延長(zhǎng)或縮短。

  如何收集血清和血漿？

  血清的收集過(guò)程包括讓血液凝結(jié)，通常需要大約 30 分鐘，然后離心樣品以分離血清。

  血漿的收集過(guò)程包括在樣品離心之前添加抗凝劑，例如肝素或 EDTA。然后收集上層液體，即血漿

  所需材料：

  ? 含有抗凝劑（例如 EDTA、肝素或檸檬酸鈉）的采血管

  ? 無(wú)菌針頭和注射器或真空采血管系統(tǒng)

  ? 離心機(jī)

  ? 移液器

  ? 個(gè)人防護(hù)裝備（手套、實(shí)驗(yàn)服、護(hù)目鏡）

  如何采集血清？

  下面概述了收集血清的關(guān)鍵步驟：

  1 穿戴個(gè)人防護(hù)裝備。

  2 使用適當(dāng)?shù)南緞┣鍧嶌o脈穿刺部位。

  3 使用無(wú)菌針頭和注射器或真空采血管系統(tǒng)進(jìn)行靜脈穿刺，并將血液收集到管中。

  4 將試管置于室溫下，使其不受干擾，以便血液凝結(jié)。這通常需要 15-30 分鐘。

  5 凝固后，將管在冷凍離心機(jī)中以 1,000–2,000 xg 離心 10 分鐘以分離血清。

  6 小心地將血清（頂層）移入新管中，確保不會(huì)擾亂凝塊。

  7 將新管標(biāo)記為“血清”

  如何采集血漿？

  下表概述了收集血漿的關(guān)鍵步驟：

  1 穿戴個(gè)人防護(hù)裝備。

  2 使用適當(dāng)?shù)南緞┣鍧嶌o脈穿刺部位。

  3 使用無(wú)菌針頭和注射器或真空采血管系統(tǒng)進(jìn)行靜脈穿刺，并將血液收集到含有抗凝劑的管中。

  4 采集后立即翻轉(zhuǎn)試管5-10次，使抗凝劑與血液混合，從而防止凝血。

  5 確保管完全充滿，以避免稀釋因子對(duì)于總樣本體積而言過(guò)大。

  6 靜脈穿刺后兩小時(shí)內(nèi)或按照測(cè)試要求離心樣品，將血漿與細(xì)胞分離。

  7 小心地將血漿（頂層）移入新管中，確保不會(huì)干擾血沉棕黃層或紅細(xì)胞。

  8 將新管標(biāo)記為“血漿”并注明所用抗凝劑的類(lèi)型。

  血清和血漿中的鋅含量

  血漿和血清鋅是人體內(nèi)鋅的兩種形式。鋅是一種必需礦物質(zhì)，在各種生理過(guò)程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。血漿鋅是指血液液體成分中鋅的濃度，是在血液樣本中添加抗凝劑時(shí)獲得的。另一方面，血清鋅是指血液凝固并去除細(xì)胞后殘留的透明淡黃色液體中鋅的濃度。

  通常測(cè)量血漿和血清鋅水平來(lái)評(píng)估一個(gè)人的鋅狀況。然而，由于血清分離中涉及的凝血過(guò)程，它們的濃度可能略有不同。血漿鋅水平往往略高于血清鋅水平，因?yàn)樵诜蛛x過(guò)程中一些鋅從凝塊中釋放出來(lái)。

  測(cè)量血漿或血清鋅水平可以提供有關(guān)個(gè)人鋅狀況的寶貴信息。缺鋅會(huì)導(dǎo)致各種健康問(wèn)題，例如免疫功能受損、生長(zhǎng)遲緩和傷口愈合延遲。相反，過(guò)量的鋅也會(huì)對(duì)健康產(chǎn)生不利影響。因此，監(jiān)測(cè)血漿或血清鋅水平對(duì)于識(shí)別缺乏或過(guò)量并確定適當(dāng)?shù)母深A(yù)措施（例如飲食調(diào)整或補(bǔ)充鋅）以維持體內(nèi)最佳鋅平衡非常重要。

  哪種放血管產(chǎn)生血漿與血清？

  放血管頂部的不同顏色表明管中添加劑的類(lèi)型。對(duì)于血漿管，通常使用淺藍(lán)色、綠色或淡紫色頂部，因?yàn)樗鼈兒锌鼓齽?duì)于血清采集，通常使用紅色或金色頂管，它們不含抗凝劑。

  為什么在血清和血漿中測(cè)量酶？

  酶測(cè)量可以在血清或血漿中進(jìn)行。然而，一些酶，如鉀依賴性酶，可能會(huì)受到血漿中抗凝劑的影響。因此，血清通常是酶測(cè)定的首選。

  血清酶：

  ? 丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶 (ALT)

  ? 天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶 (AST)

  ? 堿性磷酸酶 (ALP)

  ? γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶 (GGT)

  ? 乳酸脫氫酶 (LDH)

  ? 肌酸激酶 (CK)

  等離子體凝血因素：

  ? II 因子（凝血酶原）

  ? V 因子（不穩(wěn)定因子）

  ? 因子 VII（轉(zhuǎn)化素原）

  ? 因子 VIII（抗血友病因子 A）

  ? 因素 IX（圣誕節(jié)因素）

  ? X 因子（斯圖爾特-普羅爾因子）

  ? XI 因子（血漿凝血活酶前體）

  ? 因子 XII（哈格曼因子）

  ? XIII 因子（纖維蛋白穩(wěn)定因子）

  血小板相關(guān)酶：

  ? 凝血酶

  ? ADP（二磷酸腺苷）

  ? 血清素

  ? 血栓素A2

  ? 血小板活化因子 (PAF)

  ? 磷脂酶A2

  ? 環(huán)氧合酶 (COX)

  ? 磷酸二酯酶

  ? 膠原酶

  ? 彈性蛋白酶

  使用 ELISA 測(cè)量血清和血漿中的分析物

  ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定）是一種廣泛使用的測(cè)量血清和血漿中分析物的方法。通過(guò)利用與目標(biāo)分析物結(jié)合的特異性抗體，ELISA 能夠檢測(cè)和定量這些生物液中的蛋白質(zhì)、激素和其他分子。通過(guò)抗體結(jié)合、洗滌、酶標(biāo)記和信號(hào)測(cè)量等一系列步驟，ELISA 提供了一種靈敏且可靠的技術(shù)來(lái)評(píng)估血清和血漿樣品中的分析物濃度。這一有價(jià)值的工具有助于研究、臨床和診斷應(yīng)用，提供對(duì)特定分子水平及其對(duì)健康和疾病影響的見(jiàn)解。