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NK-92MI人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞
基本信息
產(chǎn)品品牌 ：通蔚生物
中文名稱 ：人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞
細(xì)胞簡(jiǎn)稱 ： N K-92M I
細(xì)胞別稱 ： N K-92M I;N K-92mi;N K 92-M I;N K92M I;N K -92 transfected withM FG-Hil2
細(xì)胞形態(tài) ： 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 ： 懸浮細(xì)胞
培養(yǎng)環(huán)境 ： 空氣，95% ；CO2，5% 37℃
凍存條件 ： 90% FBS+ 10% DM SO液氮
完全培養(yǎng)基 ： M EM α(PM 150422)＋0.2mM Inositol＋0.1mM β-m ercaptoethanol(P B 180633)＋0.02m M FolicAcid＋12.5%H S(164215)＋12.5% F B S(164210-50)＋1% P /S(P B 180120)
傳代步驟
可通過補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基或者離心換液兩種方式維持培養(yǎng)，離心轉(zhuǎn)速參考1200 rpm （250g左右），離心3分鐘
換液頻次 ： 2~ 3次/周
傳代比例（密度） ： 5×10^ 5-1×10^ 6cells/m L
收貨注意事項(xiàng) ： N K-92M I常溫細(xì)胞收貨注意事項(xiàng)
1. 細(xì)胞剛收到后細(xì)胞先豎立著靜置 2~ 4個(gè)小時(shí)，讓細(xì)胞沉降到底部。
2. 細(xì)胞靜置完后把瓶中培養(yǎng)基上面部分培養(yǎng)基小心吸出，留底部細(xì)胞和3ml左右培養(yǎng)基在原瓶。
3. 吸出的細(xì)胞離心收集細(xì)胞沉淀，離心轉(zhuǎn)速1200轉(zhuǎn)3分鐘，或者根據(jù)您的離心機(jī)實(shí)際情況而定。
4. 將得到的細(xì)胞沉淀用該細(xì)胞。
對(duì)應(yīng)的完培重懸后放回原瓶繼續(xù)培養(yǎng)過夜，一個(gè)T25最終培養(yǎng)體積是5~6毫升。
5. 我們出廠的培養(yǎng)瓶為不透氣瓶蓋，一定要擰松到不掉的程度，使細(xì)胞透氣。
6. 培養(yǎng)瓶橫放瓶口擰松透氣培養(yǎng)過夜。
7. 第二天視細(xì)胞密度和培養(yǎng)基消耗情況進(jìn)行分瓶，可以不離心。
細(xì)胞背景描述
N K -92細(xì)胞是從一位患有急進(jìn)性非霍奇金淋巴瘤的50歲白人男性外周血單核細(xì)胞衍生來的一株IL-2依賴型N K 細(xì)胞株。N K -92M I細(xì)胞是轉(zhuǎn)染得到的源自N K -92細(xì)胞的IL-2非依賴的N K 細(xì)胞株。親本細(xì)胞N K -92通過微粒體基因轉(zhuǎn)化法用逆轉(zhuǎn)錄病毒M FG -hIL-2載體攜帶的人IL-2cDN A 進(jìn)行轉(zhuǎn)化?？赡苡捎谳d體整合到基因組D N A 中，轉(zhuǎn)化是穩(wěn)定的。這株細(xì)胞對(duì)很多惡性細(xì)胞有細(xì)胞毒性；鉻釋放試驗(yàn)顯示它能殺死K562細(xì)胞和D audi細(xì)胞。N K -92細(xì)胞有以下特征：C D 2、C D 7、C D 11a、CD 28、CD 45、CD 54表面標(biāo)記陽性；CD 1、CD 3、CD 4、CD 5、CD 8、CD 10、CD 14、CD 16、CD 19、CD 20、CD 23、CD 34和H LA-D R表面標(biāo)記陰性。其親本IL-2依賴的細(xì)胞株N K -92細(xì)胞及另一株同樣來源于N K -92細(xì)胞株的IL-2非依賴的細(xì)胞株N K -92C I都可從A TC C 得到。NK -92M I細(xì)胞和N K -92C I細(xì)胞這兩個(gè)變種都包含、表達(dá)并合成hIL-2cDN A。N K-92M I細(xì)胞合成的IL-2水平比N K -92C I高，而親本細(xì)胞不合成表達(dá)。1998年9月提交到A T C C 的培養(yǎng)物污染了支原體，其后代通過BM 細(xì)胞周期蛋白處理21天消除支原體。處理后6周，用H oechst染色、PC R 和標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)測(cè)試進(jìn)行支原體檢測(cè)，結(jié)果都呈陰性。
供體年齡 ： 男性，50歲
組織來源 ： 外周血
細(xì)胞類型 ： 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 ： 淋巴瘤細(xì)胞
生物安全等級(jí) ： 2
細(xì)胞保藏中心 ： ATCC ; C R L-2408
收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請(qǐng)參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細(xì)胞后，及時(shí)拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5. 若觀察到異?；蛘邔?duì)細(xì)胞有疑問，請(qǐng)及時(shí)跟我們聯(lián)系；對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)。可跟我們的技術(shù)支持交流。
售前須知
該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞，請(qǐng)注意離心收集細(xì)胞懸液；請(qǐng)勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。
