NK-92人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞
基本信息
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
中文名稱 :人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞
細(xì)胞簡稱 : N K-92
細(xì)胞別稱 : N K92;N aturalKiller-9 2;N K-92.05;N eukoplast;aNK
細(xì)胞形態(tài) : 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 : 懸浮細(xì)胞
培養(yǎng)環(huán)境 : 空氣,95% ;CO2,5% 37℃
凍存條件 : 90% FBS+10% D M SO液氮
完全培養(yǎng)基 : M EM α(PM 150422)+0.2mM Inositol+0.1mM β-m ercaptoethanol(P B 180633)+0.02m M FolicAcid+100-200U /m Lrecom bin an tIL-2+12.5% H S(164215)+12.5% F B S(164210-50)+1%P /S(P B 180120)
傳代步驟
可通過補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基或者離心換液兩種方式維持培養(yǎng),離心轉(zhuǎn)速參考1200 rpm (250g左右),離心3分鐘
換液頻次 : 2~ 3次/周
傳代比例(密度) : 5×10^ 5-1×10^ 6cells/m L
收貨注意事項 :N K -92常溫細(xì)胞收貨注意事項
1. 細(xì)胞剛收到后細(xì)胞先豎立著靜置2~ 4 個小時,讓細(xì)胞沉降到底部。
2. 細(xì)胞靜置完后把瓶中培養(yǎng)基上面部分培養(yǎng)基小心吸出,留底部細(xì)胞和3ml左右培養(yǎng)基在原瓶。
3. 吸出的細(xì)胞離心收集細(xì)胞沉淀,離心轉(zhuǎn)速1200轉(zhuǎn)3分鐘,或者根據(jù)您的離心機(jī)實際情況而定。
4. 將得到的細(xì)胞沉淀用該細(xì)胞對應(yīng)的完培重懸后放回原瓶繼續(xù)培養(yǎng)過夜,一個T25最終培養(yǎng)體積是5~6毫升。
5. 我們出廠的培養(yǎng)瓶為不透氣瓶蓋,一定要擰松到不掉的程度,使細(xì)胞透氣。
6. 培養(yǎng)瓶橫放瓶口擰松透氣培養(yǎng)過夜。
7. 第二天視細(xì)胞密度和培養(yǎng)基消耗情況進(jìn)行分瓶,可以不離心。
細(xì)胞背景描述
N K -92細(xì)胞是從一位患有急進(jìn)性非霍奇金淋巴瘤的50歲白人男性外周血單核細(xì)胞衍生來的一株IL-2依賴型N K 細(xì)胞株。N K -92細(xì)胞對很多惡性細(xì)胞有細(xì)胞毒性;鉻釋放試驗顯示它能殺死K 562細(xì)胞和D audi細(xì)胞。N K -92細(xì)胞(經(jīng)過照射以防止增殖)可以有效地用于血液中白血病的體外免疫清掃而不危及血細(xì)胞的功能。N K -92細(xì)胞有以下特征:CD 2、C D 7、C D 11a、C D 28、C D 45、C D 54表面標(biāo)記陽性;C D 1、C D3、CD 4、CD 5、CD 8、CD 10、CD 14、CD 16、CD 19、CD 20、CD 23、C D 34和H LA -D R表面標(biāo)記陰性。
倍增時間 : ~ 40-50小時
供體年齡 : 男性,50歲
組織來源 : 外周血
細(xì)胞類型 : 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 : 淋巴瘤細(xì)胞
生物安全等級 : 2
細(xì)胞保藏中心 : ATCC ; C RL-2407 D SM Z ; AC C -488
收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細(xì)胞后,及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5. 若觀察到異?;蛘邔?xì)胞有疑問,請及時跟我們聯(lián)系;對于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)??筛覀兊募夹g(shù)支持交流。
售前須知
該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,請注意離心收集細(xì)胞懸液;請勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。