α-甘露糖苷酶(α-Mannosidase,α-Man)活性檢測(cè)試劑盒分光法/24樣
測(cè)定規(guī)格:24樣
有 效 期:6個(gè)月
測(cè)定方法:分光光度法
保存條件:低溫避光保存
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
α-甘露糖苷酶(EC 3.2.1.24,α-Man)是參與植物體內(nèi) N-聚糖加工的關(guān)鍵酶之一。是植物細(xì)胞壁糖蛋白代謝過(guò)程中的關(guān)鍵性糖苷酶,在分生組織的生長(zhǎng)、果實(shí)的成熟軟化、種子的萌發(fā)等生理進(jìn)程中起重要作用。α-甘露糖苷酶(α-Man)催化對(duì)硝基苯酚-α-D-吡喃甘露糖苷產(chǎn)生對(duì)硝基苯酚(PNP),該產(chǎn)物在 405nm 處有特征吸收峰,通過(guò)測(cè)定 405nm 光吸收增加速率,即可計(jì)算α-甘露糖苷酶活性。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、可調(diào)式移液器、低溫離心機(jī)、天平、研缽、冰和蒸餾水。
α-甘露糖苷酶(α-Man)活性測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)!
標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過(guò)程:
1. 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液(10μmol/mL):向標(biāo)準(zhǔn)品 EP 管里面加入 1mL 蒸餾水。
2. 把母液稀釋成以下濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品:0, 0.4, 0.8, 1.2, 1.6, 2μmol/mL。也可根據(jù)實(shí)際樣本來(lái)調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。
3. 在 EP 管中依次加入:30μL 標(biāo)準(zhǔn)品+340μL 試劑二+350μL 試劑三,混勻轉(zhuǎn)移全部液體至 1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)中,于 405nm 下讀取吸光值,根據(jù)結(jié)果制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。