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021-54845833/15800441009
天冬酰胺酶(ASNase/asparaginase)活性測定試劑盒分光法/48樣
產(chǎn)品簡介:
天冬酰胺酶（EC 3.5.1.1，ASNase）是一種酰胺水解酶，能夠?qū)?L-天冬酰胺脫去氨基生成 L-天冬氨酸和氨。該酶具有抗腫瘤活性，在食品和醫(yī)藥等領(lǐng)域應(yīng)用十分廣泛。天冬酰胺酶（ASNase）催化天冬酰胺水解成天冬氨酸和氨，利用氨在強(qiáng)堿的環(huán)境下與次氯酸鹽和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚藍(lán)，溶液顏色穩(wěn)定。其在 630nm 處有特征吸收峰，通過檢測氨增加的速率，即可計(jì)算該酶活性大小。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、常溫離心機(jī)、移液器、蒸餾水、振蕩儀。天冬酰胺酶(ASNase)活性測定:
1、樣本制備：
① 組織樣本：
稱取約 0.1g 組織（水分足的樣本可取 0.2-0.5g），加入 1mL 提取液；進(jìn)行冰浴勻漿。12000rpm，4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
[注]：也可以按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例提取。
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本：
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程：
1. 標(biāo)準(zhǔn)品母液（10μg/mL 的氨），把母液用蒸餾水稀釋成以下濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品：0, 2, 4, 6, 8, 10 μg/mL。也可根據(jù)實(shí)際樣本來調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。
2. 按照顯色反應(yīng)階段的測定管加樣體系操作，根據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
