SW480人結腸癌細胞(L15)
基本信息
產品品牌 :通蔚生物
中文名稱 : 人結腸癌細胞
細胞簡稱 : SW 480 [SW -480]
細胞形態(tài) : 上皮細胞樣
生長特性 : 貼壁細胞
培養(yǎng)環(huán)境 : 空氣,100% 37℃
凍存條件 : 55% 基礎培養(yǎng)基+40% FBS+5% DMSO 液氮
完全培養(yǎng)基 : Leibovitz's L-15(PM151010)+10% FBS(164210-50)+1%P/S(PB180120)
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液(含ED TA ),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞。4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細胞塊中間的細胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細胞使之脫壁并在液體里反復吹打使細胞盡量呈單顆細胞的懸浮液。
6、收集細胞懸液離心,1200rpm /min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進行培養(yǎng)。
消化時間 : 2~ 3分鐘
換液頻次 : 2~ 3次/周
傳代比例(密度) : 1:2-1:4
細胞背景描述
SW 480 [SW -480]細胞源自原位直腸腺癌,和SW 620細胞源自同一病人一年后的淋巴結轉移。CSAp和直腸抗體3陰性;角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。p53基因第273位密碼子的G →A突變引起A rg→His替代,309位密碼子的C →T突變導致Pro→Ser替代。細胞p53蛋白表達水平提高,癌基因c-m yc、K -ras、H -ras、N -ras、m yb、sis和 fo s的表達呈陽性,癌基因N -m yc的表達未做檢測。SW 480 [SW -480]細胞不表達細胞溶解酶,一種與腫瘤入侵相關的金屬蛋白酶。有報道稱,SW 480 [SW -480]細胞表達G M -C SF。SW 480 [SW -480]細胞 ras原癌基因的12位密碼子有一個突變,可以用作PC R 法檢測該突變的陽性對照。1978年11月,ALeibovitz將其提交給ATCC時已傳代至第91代。
致 瘤 性 : Yes.Tum orsdeveloped within 21 daysat100% frequency (5/5)in nudemiceinoculated subcutaneouslywith 1×10^7 cells.
倍增時間 : 30-50小時
受體表達 : epiderm algrow th factor(EG F)
細胞類型 : 腫瘤細胞
基因表達 : carcinoem bryonic antigen (C EA)0.7 ng/10^6 cells/10 days;k eratin;tran sfo rming grow th factorbeta,m yc+;m yb+;ras+;fo s+;sis+;p53+;abl-;ros-;src -,HLA A2,B8,B17;Blood TypeA;Rh+,The cellsare positive fork eratinbyim m unoperoxidase staining.,T helineispositive forexpression ofc-m yc,K -ras,H -ras,N -ras,myb,sisand fosoncogenes.
組織來源 : 直腸;結直腸腺癌
腫瘤類型 : 腸癌細胞
生物安全等級 : 1
供體年齡男性 : 50歲
細胞保藏中心 : ATCC ; C C L-228D SM Z ; ACC-313ECACC ; 87092801
收到常溫細胞后如何處理
細胞培養(yǎng)詳細操作步驟請參照酶聯(lián)生物細胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細胞后,及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75% 酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片 將作為后續(xù)服務依據);建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5. 若觀察到異?;蛘邔毎幸蓡?,請及時跟我們聯(lián)系;對于細胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)注意事項有疑問的,可跟我們的技術支持交流。
售前須知
1、該細胞推薦使用Leibovitz'sL-15培養(yǎng)基進行培養(yǎng),Leibovitz'sL-15不可以通入二氧化碳,會產生細胞毒性。
2、該細胞不建議更換為DMEM 培養(yǎng),圓形較多,效果不好。